寺庙双乳高耸嗯啊h,破處女特級a片在线观看,最新毛片婷婷99精品视频,国产精品无码

銷售熱線

19126518388

  • 技術(shù)文章ARTICLE

    您當(dāng)前的位置：首頁 > 技術(shù)文章 > 制備YAC DNA進(jìn)行Southern印跡分析

    制備YAC DNA進(jìn)行Southern印跡分析

    發(fā)布時(shí)間： 2021-12-24　　點(diǎn)擊次數(shù)： 948次

    材料與儀器

    酵母菌
    AHC SCE SCEM Tris·Cl EDTA TE 乙酸甲 RNase A 異丙醇 NaCl
    培養(yǎng)箱 離心管 轉(zhuǎn)子

    步驟


    1.  接種一個(gè)紅色的含YAC克隆的酵母菌落于盛有20 ml AHC培養(yǎng)基的250 ml 三角燒瓶中，在旋轉(zhuǎn)搖床上30℃ 250 r/min 振蕩培養(yǎng)24 h。
     
    2.  擴(kuò)大培養(yǎng)：取1ml 由步驟1獲得的粉紅色菌懸液接種于盛有100 ml AHC培養(yǎng)基的 1 000 ml三角燒瓶中，于30℃ 250 r/min搖床培養(yǎng)24 h。

    3.  將菌懸液移入2個(gè)50 ml 的錐形離心管中，于2 000 g 離心5 min，棄上清，共用5 ml SCE緩沖液重懸菌體，并合并到一個(gè)試管中。

    4.  加1 ml SCEM緩沖液，在旋轉(zhuǎn)搖床中37℃ 100 r/min 輕搖晃混勻。

    5.  于4℃ 2 000 g 離心棄上清，菌體用5 ml Tris/EDTA裂解液重懸。

    6.  加0.5 ml 10%SDS顛倒混合數(shù)次，于65℃溫育20 min。
     
    7.  加2 ml 冰浴的5 mol/l pH4.8的乙酸甲緩沖液，顛倒混合數(shù)次后置于冰浴60 min。

    8.  于室溫2 000 g 離心10 min，小心將含核酸的上清轉(zhuǎn)移到一個(gè)新管中。加室溫2倍體積的95%乙醇，顛倒混勻。

    9.  于室溫2 000 g 離心5 min，棄上清，在室溫晾干10~15 min，分別加入3 ml TE緩沖液，pH8.0于37℃過夜溶解核酸。

    10.  加入0.1 ml 的1 mg/ml 無DNA酶活性的RNase A，于37℃溫育1 h。
     
    11.  加入6 ml 室溫的異丙醇，振蕩并顛倒混勻后用一支毛細(xì)管纏繞起染色體，然后溶于0.5 ml TE緩沖液中。

    12.  加入50 μl 5 mol/l NaCl和2 ml 95%乙醇，顛倒混勻。

    13.  再一次纏繞起染色體DNA，并溶于0.5 ml TE緩沖液中，于4℃保存?zhèn)溆谩?/div> 
    14.  取毎小份2 μg 的YAC DNA和15 μg 用以構(gòu)建YAC文庫的某物種或個(gè)體的基因組DNA。

    15.  采用幾種高頻切割的限制性內(nèi)切酶進(jìn)行酶切，接著用單拷貝探針進(jìn)行雜交和核酸印跡分析。
     
    16.   一旦通過核酸印跡實(shí)驗(yàn)確證YAC克隆，那么可通過制備染色體凝膠校塊塞和進(jìn)行脈沖電場凝膠電泳，來明確重組YAC的大小并對其穩(wěn)定性進(jìn)行初步評價(jià)。


    同實(shí)驗(yàn)其他方法

    YAC 克隆的分析實(shí)驗(yàn)

    1.  用接種棒將含重組載體pYAC的AB1380菌株劃線接種在AHC平板上，倒扣平板于30℃培養(yǎng)，直至長出1~3 mm 大小的紅色菌落為止。 2.  短期保存：用Parafilm膜將平

    以上就是本期的內(nèi)容，更多資訊，歡迎點(diǎn)擊安培生物網(wǎng)站鏈接了解更多技術(shù)與產(chǎn)品資訊。


    安培生物科技有限公司介紹：

    安培生物堅(jiān)持為生命科學(xué)研究、活體動(dòng)物轉(zhuǎn)染、大規(guī)模生物生產(chǎn)、基因和細(xì)胞治療領(lǐng)域客戶，提供*細(xì)胞體內(nèi)可代謝的核酸轉(zhuǎn)染試劑；inviCELL™Platelet lysate無動(dòng)物血清產(chǎn)品旨在支持廣泛的細(xì)胞擴(kuò)增和生產(chǎn)，包括培養(yǎng)間充質(zhì)干細(xì)胞和多種免疫細(xì)胞系等，為制藥公司或者生物技術(shù)公司提供無血清細(xì)胞培養(yǎng)規(guī)模生產(chǎn)服務(wù)；提供以植物生物為平臺基因序列全人源化、*的細(xì)胞培養(yǎng)可分解3D基質(zhì)膠產(chǎn)品；提供內(nèi)毒素≦ 1.0 EU/mL、對細(xì)胞無毒性影響、高純度的一型膠原蛋白產(chǎn)品。安培生物專注為生物醫(yī)藥領(lǐng)域提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品和技術(shù)服務(wù)，努力發(fā)展為基因治療、細(xì)胞治療的生物科技企業(yè)。


產(chǎn)品中心 Products
xxxx18一20岁hd| 国产a国产片国产| 3d动漫精品啪啪一区二区| 少妇脱了内裤让我添| 粉嫩METART人体欣赏| 交换年轻夫妇HD中文字幕3D| 无码人妻熟妇av又粗又大| 欧美最猛性xxxxx69交| 欧洲熟妇另类久久久久久| 国产SUV精二区九色| caoporn免费视频国产| 国产女人乱人伦精品一区二区| 东北妓女脏话对白AAAAA片?| 被带到调教室刑床惩罚挠痒痒作文| 巨胸爆乳美女露双奶头挤奶| 人人妻人人澡人人爽国产一区| 女仆穿白丝裸体吃奶玩乳视频| 青青久久久久精品亚洲AV中文| JAPANESE熟女俱乐部| 婷婷国产成人精品视频小说| 最近中文字幕大全在线看| 西西人体www大胆高清| 色播久久人人爽人人爽人人片AV| 少妇厨房愉情理伦BD在线观看| 日韩精品一区| 国产一二三四区中| 久久亚洲AV无码精品色午夜麻豆 | 成人区色情综合小说| 艳鉧动漫1～6风车动漫| 人妻精品久久久久中文字幕69| 亚洲AV无码久久寂寞少妇| 麻豆一区二区99久久久久| 三男三女换着曰| 大战丰满人妻50P| 精品国产乱码久久久久久免费| 国产精品高潮呻吟av久久96| 另类老熟女hd| 小13箩利洗澡无码视频网站免费| 饱满的乳峰喷奶水视频| xxx少妇厨房xxx乱| 色8久久人人97超碰香蕉987|